Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)说明书

     BIOHUB的CCK-8试剂盒是用白色的WST-8固体粉末配置的，颜色为粉红色，保存期更长，实验重复性更好！ WST-8(水溶性四唑（2-（2-甲氧基-4硝基苯）-3-(4-硝基苯)-5-（2,4-二磺基苯）-2H-四唑单钠盐），是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，被线粒体内的脱氢酶还原成橙黄色的水溶性的甲臜染料(formazan,下图)， 这种甲臜染料直接溶解在培养基中。水溶性四唑被细胞内脱氢酶生物还原后生成的甲臜能够。细胞增殖越多越快，则培养基的颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。正是利用这一特性开发的CCK-8试剂盒直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法应用非常广泛，可以用于生物活性因子的活性检测，抗肿瘤药物的筛选，细胞增值的测定，细胞毒性检测以及药敏等与细胞活性和增殖相关的实验。本试剂盒使用方便，试剂盒包含一管已经配制好的含有水溶性四唑的CCK-8溶液，即开即用，无需其他准备步骤。检测过程也无需采用额外的步骤去溶解甲臜，可直接使用96孔板或者384孔板在酶标仪上检测，适合大规模高通量的样品检测。

                                  CCK-8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较

     CCK8试剂盒提供了一种灵敏度高，操作简便，使用安全，重现性好的细胞增殖与活性检测方法。与传统的MTT相比无需有机溶剂和放射性同位素，步骤少，无损失，结果准确！本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有WST-8的CCK-8溶液，无须再进行任何配制等操作 。无须使用同位素，所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外的步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。

     1.MTT实验生成的甲臜不是水溶性的，需要使用DMSO等有机溶剂溶解；而本方法产生的甲臜是水溶性的，不仅省去了溶解的步骤，更因此而减少了该操作步骤带来的误差。

     2.与MTT方法相比，本方法线性范围更宽，灵敏度更高。本方法对细胞无损害，因此加入CCK-8显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读数多次测定从而找到最佳测定时间。

     3.本方法所用试剂在培养基中比MTT更加稳定，实验效果重复性好。

     4.MTT具有毒性，同时其生成的甲臜需要有机溶剂溶解，会对操作人员身体造成危害。本试剂无毒，使用中无需有机溶剂，操作更加安全。

     5.本试剂盒在4℃避光可长期保存，使用无需配制，即开即用。

     6.酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰（扣除空白孔即可）

CCK-8溶液在避光，0-5℃的条件下可以保存一年； -20℃下保存2年；如需经常使用请将试剂存放在0-5℃，为防止背景值增加干扰实验结果，请勿反复冻融。

1.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2.本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。